Искусственное осеменение сук

Искусственное осеменение сук дает возможность использовать ценных кобелей гораздо полнее, чем при естественной вязке. Применяя метод искусственного осеменения, мы можем проводить племенную работу в собаководстве не только в пределах одного населенного пункта, но, перевозя полученную от кобелей сперму, оплодотворять ею сук, находящихся и в отдаленных местах.

Перевозка спермы способствует и борьбе с родственным разведением в собаководстве. При хорошей организации сохранения и транспортировки спермы будет возможность вместо покупки ценного производителя приобретать его сперму. Так что искусственное осеменение является одним из основных мероприятий, способствующих широкой постановке улучшения племенной работы в собаководстве.

Искусственное осеменение целесообразно применять во многих случаях. Некоторые молодые суки не подпускают самца, поэтому их осеменить можно только искусственно.

При искусственном осеменении мы имеем возможность получить оплодотворение даже при некоторых патологических процессах полового аппарата суки. Так, например, при воспалении влагалища сперма, попавшая при вязке во влагалище суки, погибает. При искусственном же осеменении сперму вводят непосредственно в матку и она остается активной.

Как известно, в течение последних лет очень много научно-исследовательских работ было выполнено по изучению спермы и разработке техники искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. Собакам же в этом направлении не было уделено должного внимания, хотя первым искусственно осемененным животным была собака. Но проведенными немногочисленными исследованиями получены определенные показатели.

Как известно, сперма кобеля является продуктом секреторной деятельности его полового аппарата, выделяемым во время полового акта. Она состоит из форменных элементов - сперматозоидов (половых клеток кобеля) и сыворотки - секрета придаточных половых желез, предстательной и уретральных (куперовские и пузырьковидные железы у кобеля отсутствуют) (рис. 115).

Рис. 115. Нормальная сперма кобеля под микроскопом (увеличение в 635)

Объем спермы, выделенный во время полового акта, называют эякулятом.

Сперму кобеля можно получать методом мастурбации или при помощи искусственной вагины.

Мастурбация - механическое раздражение головки полового члена трением пальцами руки через препуциальный мешок вызывает эрекцию, а затем и эякуляцию. Сперму собирают в резервуар.

Метод получения спермы при помощи искусственной вагины является более совершенным и дает сперму более высокого качества по сравнению с мастурбацией.

Искусственная вагина представляет собой цилиндр, состоящий из двух трубок: наружной - пластмассовой (длиной 15-20 см) и внутренней - резиновой. Резиновая трубка должна быть длиннее пластмассовой, так чтобы концы резины заходили на наружную и их можно было фиксировать на ней резиновыми кольцами. Внутренняя трубка на наружную должна быть натянута равномерно. Между двумя трубками образуется полость, куда через отверстие, имеющееся на наружной трубке, наливают горячую воду. Один конец искусственной вагины оставляют открытым, а на другом - укрепляют спермоприемник для собирания спермы. Отверстие, через которое наливают воду, соединяют с резиновым баллоном резиновой трубкой. Этот баллон предназначен для воздушной пульсации в вагине во время эякуляции (рис. 116).

Рис. 116. Искусственная вагина

Подготовка искусственной вагины для полового акта заключается в создании соответствующих условий: давления (внутренний диаметр должен быть 2-3 см), температуры - при наличии горячей воды (к моменту садки вода должна иметь 40-41°), скользкости, что достигается смазыванием внутренней поверхности чистым, стерильным вазелином.

Кобели легко совершают половой акт при посредстве искусственной вагины, даже при отсутствии около него суки в состоянии пустовки. После окончания акта эякуляции спермоприемник, наполненный спермой, отъединяют от искусственной вагины. Сперму проверяют, и при наличии хороших качеств ее используют (рис. 117).

Рис. 117. Получение спермы при помощи искусственной вагины

В литературе имеется ряд работ по изучению состава спермы кобелей.

Алифанов (1934) провел исследование спермы у 30 кобелей и установил, что объемы их эякулятов колебались от 1,5 до 2,5 мл. Наименьший объем эякулята был у кобелей, которые сук совершенно игнорировали. 1 мл спермы содержал (в среднем) 189 млн. сперматозоидов. Алифанов также определил, что сперма кобеля созревает (после эякуляции) через 24-72 часа.

Фрейберг (1935) установил, что сперма состоит из трех частей:

1) выделения уретральных желез (от 1 до 2 мл),

2) спермосодержащей части (от 2 до 4 мл) и

3) выделения предстательной железы (достигает 30 мл).

Лемберт Мак-Кензи (1940) дал следующие сведения о сперме кобеля. Объем эякулята достигает 2-19 мл с густотой от 10 до 90 млн. сперматозоидов в 1 мл.

Петерс (1943) заявил, что средний объем эякулята в его учете был равен 3,2 мл и что соответствия между густотой и объемом не замечено.

Ханкок Ровланд (1949) доказал, что средний объем эякулята равен 6,5 мл и что объем варьирует обратно пропорционально густоте. Определение густоты сперматозоидов дало среднюю цифру, равную 27 млн. в 1 мл.

Нудер (1950) в своих исследованиях установил, что объем эякулята колеблется от 1 до 20 мл. Он считает, что хорошая сперма должна иметь в 1 мл от 88 до 588 млн. сперматозоидов.

Из большинства этих исследовательских работ видно, что хороший образец семени не должен содержать более 20% патологических сперматозоидов.

Харроп (1954), получая при помощи искусственной вагины сперму кобелей (различных пород), пришел к заключению, что средний объем эякулята составляет 9,5 мл, причем более мелкие породы в большинстве случаев дают меньшее количество спермы, чем более крупные. Он детально изучил те фракции (части) спермы, о которых говорилось ранее. Это было сделано установлением чистой градуированной пробирки в искусственную вагину после того, как каждый раз была получена жидкость (рис. 118).

Рис. 118. Сперма кобеля в трех фракциях: 1 - первая фракция; 2 - вторая фракция; 3 - третья фракция

Первая фракция, объем которой варьировал от 0,25 до 2 мл, состояла из чистой водянистой жидкости и содержала немного (или совсем не содержала) сперматозоидов. Это, вероятно, секрет желез слизистой оболочки уретрального канала.

Вторая часть почти белого цвета и гораздо более вязкой консистенции имела объем от 0,5 до 3,5 мл и содержала сперматозоиды.

Третья часть, состоящая из выделений предстательной железы, была тоже прозрачной по внешнему виду и водянистой по консистенции. Объем этой фракции колеблется от 3 до 20 мл соответственно породе и величине собак, причем и эта фракция может значительно варьировать у одного и того же самца при различных случаях. Сперматозоидов она содержит очень мало (или совсем не содержит).

Оценка спермы. Тотчас же после получения пробирку со спермой помещают в теплую воду с температурой 35° с тем, чтобы сперма могла постепенно охлаждаться и не подвергаться температурному шоку.

Зрительное исследование. В зависимости от густоты цвет всей выделенной спермы кобеля может изменяться от водянисто-серого до молочно-белого. При отстаивании сперма постепенно разделяется на два слоя, спермовые клетки оседают на дно, а сверху находится полупрозрачная жидкость.

Микроскопическое исследование подвижности сперматозоидов. Исследование на подвижность должно быть произведено немедленно после сбора. Каплю спермы при помощи стеклянной палочки наносят на теплое предметное стекло. Нормальная сперма обладает огромной активностью, вся масса совершает как бы волнистые движения. Индивидуальные движения сперматозоидов являются интенсивными в свежей сперме, и лучше всего ее изучать под микроскопом при затемненном поле зрения.

Густота. Зрительные исследования густоты дают вполне надежные сведения в отношении качества спермы, но точные данные о густоте могут быть сделаны только на основе определения концентрации спермы на единицу объема. Техника подсчета сперматозоидов такая же, какую обычно применяют для подсчета сперматозоидов сельскохозяйственных животных, при помощи счетной камеры для форменных элементов крови.

При массовом исследовании спермы кобелей цифра концентрации сперматозоидов равна 125 млн. в 1 мл. Эта цифра может значительно варьировать у кобелей разных пород, отдельных собак и у каждого самца в различных случаях. Концентрация сперматозоидов может варьировать от 4 до 540 млн. в 1 мл.

Оценка жизнеспособности сперматозоидов методом окрашивания. Из всех испытанных методов окраски лучшим оказался эозиннигрозиновый. Он состоит в том, что на нагретое предметное стекло помещают капельку спермы, смешанную с двумя каплями 5% раствора эозина. После тщательного смешивания в течение нескольких секунд стеклянной палочкой добавляют четыре капли 10% раствора нигрозина и опять смешивают. Из полученной смеси делают на другом предметном стекле мазок и фиксируют над пламенем спиртовки.

При микроскопическом исследовании сперматозоиды ясно выделяются на коричневом поле, причем живые сперматозоиды остаются неокрашенными, в то время как мертвые принимают розовый цвет эозина.

Морфология. Хорошим методом для морфологических исследований является смешивание капли спермы с каплей туши. Патология сперматозоидов хорошо констатируется. Метод окрашивания эозиннигрозином может быть также использован и для изучения морфологии сперматозоидов, применяя ту же технику, как и с тушью. Число сперматозоидов, показывающих морфологические, атипичные признаки, регистрируется, как процент ненормальных сперматозоидов.

рH нормальной собачей спермы колеблется от 5,8 до 6,9, если определять сразу же после ее сбора. Если сперму сохранять, то она становится более кислой. Средняя цифра рН собачей спермы, получаемая от трех исследований, составляет 6,75. Породных различий не отмечается. Если каждую из трех фракций спермы исследовать раздельно, то средние цифры рН будут следующими:

Влияние частоты эякуляции на количество спермы. Ввиду противоречивых взглядов по данному вопросу Хорропом (1954) были проведены опыты, чтобы определить: имеет ли частота эякуляции какое-либо вредное влияние на количество и качество спермы. Были подобраны собаки (кобели) 3-5-летнего возраста, дающие объем эякулята в среднем около 12 мл с густотой в 1 мл 180-200 млн. сперматозоидов и подвижностью 4 балла (из расчета по 5 балльной системе).

Сперму от собак получали ежедневно на протяжении 18 дней. Никаких добавлений в прежней диете собаки не получали. В конце опытов собаки были здоровы и не проявляли болезненных явлений от ежедневных эякуляций.

Результаты влияния частоты получения спермы на объем эякулята изображены в графике № 1 (рис. 119).

Рис. 119. Влияние частоты получения спермы ни объем эякулята

Влияние частоты получения спермы от собак на густоту спермы изображено в графике № 2 (рис. 120).

Рис. 120. Влияние частоты получения спермы на густоту спермы

Влияние частоты получения спермы от кобелей на подвижность изображено в графике № 3 (рис. 121).

Рис. 121. Влияние частоты получения спермы на подвижность сперматозоидов

Через 5 дней после окончания опытов сперма вновь была получена, результаты исследования которой были следующими:

Известна и скорость выделении спермы у самцов разных пород. Она зависит не только от породности, по и от индивидуальных особенностей собаки. Разница в скорости выделения как у о дольных пород, так и индивидуумов наблюдается в основном

Время выделения первой фракции 30-50 секунд. У нормального самца вслед за первой фракцией следует вторая o прДО жается 50-80 секунд. Третья фракция следует за вюрои и продолжается от 3 до 30 минут.

Первая фракция является в основном смазочным материалом. Вторая фракция содержит половые клетки кобеля. Третья фракция - секреция предстательной железы является гг

При исследовании третьей фракции намечена разница в pH в различных случаях. Щелочность третьей фракции по-видимому активирует более кислые спермопосители второй фракции Ее л каплю второй фракции поместить на теплое предметное стекло и зуч гть под микроскопом, то можно наблюдать вполне хорошую степень подвижности. Но эта подвижность значительно увеличивается, если к изучаемой сперме добавить каплю третьей

У нормального самца густота спермы очевидно будет варьировать с объемом в зависимости от количества простатической жидкости, которая содержится в выделении. Это и объясняет большие объемные вариации, полученные у исследователей многие из которых всю простатическую жидкость не собирали и изучали более высокую густоту.

Скорость выделения спермы у кобелей доказывает некоторые интересные предположения. Согласно цифрам, полученным в течение этих исследований, собаки выделяют свои первые и вторые фракции в течение 70 секунд и удивляешься, как много сильных, но неопытных самцов были признаны негодными, как стерильные, потому что они выделяли фракции первую и вторую при их первом половом возбуждении до спаривания с сукой. Здесь следует отметить, что не каждый самец будет реагировать самопроизвольно на сбор спермы независимо от метода применения. Некоторые самцы, имеющие нервный нрав, требуют время для того, чтобы они могли успокоиться и привыкнуть к окружающей обстановке до того, как они будут выделять сперму. Поэтому неразумно признавать кобеля неполноценным в половой активности, если он отказывается выделять сперму при первой потребности. Даже если самец реагирует немедленно, из этого не всегда следует, что первые выделения являются характерным образцом качественных показателей его спермы.

Что касается влияния частоты выделения (что было иллюстрировано ранее) на качество спермы, то следует помнить, что кобеля для воспроизводства ежедневно использовать нельзя. Вязку можно допускать 2-3 раза в неделю с соответствующими периодами отдыха, которые необходимы для получения здоровой спермы. Более частое использование самца в течение длительного периода поведет к ухудшению качества его спермы, в которой появятся ненормальные по форме типы незрелых сперматозоидов.

Хранение спермы. Необходимость сохранения полученной от самца спермы в собаководстве чаще всего связана с перевозкой в пункты, расположенные jia далеком расстоянии.

Сохранение жизни сперматозоидов вне организма очень кратковременно. Свежая неразбавленная сперма должна быть использована не позднее, как через 30 минут после ее получения. Продолжительность пригодности спермы может быть продлена ее разбавлением. Лучшим разбавителем спермы собак является пастеризованное молоко, которым в подогретом виде разбавляют сперму \ :8.

Известно, что некоторые теплокровные животные (суслик, тушканчик, сурок и др.) на зиму засыпают и в это время расходуют очень мало энергии. Температура их тела в это время 9-11°.

В основу хранения спермы также положено влияние низких температур, как задерживающего фактора в регуляции обмена веществ в живых организмах.

В сперме кобеля из-за слабой кислотности среды ослабление жизненных процессов (до анабиоза) почти невозможно. Вследствие непрерывного движения сперматозоиды при температуре тела быстро расходуют свои жизненные функции.

Кроме того, под влиянием большого количества секрета предстательной железы у сперматозоидов разрушается липоиднан оболочка. Вот почему при хранении спермы собаки надо устранить вредное влияние секрета этой железы и создать явление анабиоза.

Сохранять сперму собак при низкой температуре следует в разбавленном виде. Для охлаждения спермы используют специально сконструированные для этой цели термосы. Во избежание температурного шока усперматозоидовохлаждатьспермунеобходимо постепенно, избегая резких температурных скачков. Термос заполняют кусочками льда, куда в вертикальном положении помещают пробирки со спермой, залитые сверху слоем (1-2 см) чистого медицинского вазелинового масла, а затем закрытыми проваренными в парафине пробками (резиновые пробки не применяют). Пробирки должны быть обвернуты ватой.

Пополнение термоса льдом производят в зависимости от температуры окружающего воздуха примерно через следующие промежутки времени:

К хранению допускают сперму со следующими показателями: концентрация сперматозоидов - не менее 80 млн. в 1 мл; активность не менее 4 баллов; продолжительность иереживаемости 36-48 часов. Сперма собаки при 4° сохраняется до 100 часов, но желательно ее использовать через 36-48 часов после получения.

Перед использованием сохраненную сперму обязательно исследуют. Для этого берут из пробирки каплю спермы, помещают ее на предметное стекло, добавляют к ней каплю 1% раствора хлорида натрия и прикрывают покровным стеклом. Микроскопируют в специальной камере подогретой электрической лампочкой при температуре 40°. Для этой же цели можно воспользоваться и обогревательным столиком.

Транспортировка спермы. При правильной организации искусственного осеменения спермой одного производителя можно осеменить большее количество самок.

Основной трудностью осеменения является своевременность доставки спермы к суке, находящейся в стадии полового возбуждения. При современных видах транспортировки расстояние, па какое перевозится сперма, не имеет значения.

Транспортными средствами могут быть: велосипеды, лошади, автомобили, вертолеты, самолеты, почтовые голуби и другие. При перевозке сперму необходимо предохранять от переохлаждения и перегревания (поэтому обычно перевозят в термосах) без вибраций и резких встряхиваний, которые отрицательно действуют на сперматозоиды.

Пробирки со спермой должны быть снабжены ордером, где указано время получения спермы (дата и часы), кличка кобеля, порода, доза и оценка спермы. Перед осеменением доставленную сперму надо исследовать на определение ее качества, как это проделывают и со спермой после ее хранения.

Осеменение сук. Осеменять суку необходимо на 9-12-й день охоты. Осеменение проводят в стоячем положении животного, придав его передней части туловища небольшой уклон. После механической очистки полости влагалища ватой вводят сперму стеклянным шприцем -- катетером (рис. 122). С помощью влагалищного зеркала под контролем глаза конец катетера вводят в матку на глубину 0,5-1,0 см. Сперму можно вводить и без расширения влагалища зеркалом. Для этого катетер вводят "вслепую" на глубину (от половых губ) у мелких пород 6-8 см, у крупных 8-12 см. Доза введения разбавленной спермы 1-5 мл. Разница дозировки спермы, необходимой для осеменения суки, зависит от густоты. Если 1 мл спермы содержит более 150 млн. сперматозоидов, то доза в 1 мл будет являться достаточной независимо от породы собаки. После осеменения сука должна находиться с уклоном передней части туловища около 5 минут.

Рис. 122. Шприц-катетер для ввода спермы в матку